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烟草的分子鉴定是辨别其真伪，保证烟草质量，促进烟草产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒，高温烘烤等各种处理极大地破坏了烟草DNA的完整性，同时植物富含的多酚多糖及其氧化物在上述处理过程中也会与DNA发生复杂的化学反应，所以从烟草中提取DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题，本公司上开发了烟草专用核酸纯化试剂盒。

• DNA更加纯净，大多数DNA样品的OD260/280值在1.8～1.9之间。
  
• 可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
  
• 操作更加简单，离心吸附操作代替离心沉淀，整个过程室温操作约10分钟，适合大规模样品处理。
  
• 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

• 根据使用材料的不同进行下列操作：
  
  • 对新鲜或冷冻的组织：先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50～100mg组织加0.8mL预热的烟草DNA纯化溶液A1，用剪切式匀浆器匀浆30秒左右，然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
    
  • 对非冻型DNA保存液保存的组织：先用纸吸去保存液后再剪切成小块，其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
• 加入0.4mL预热的烟草DNA纯化溶液B1到裂解液中。由于烟草DNA纯化溶液B1十分粘稠，可将1mL枪头剪掉一截再用，也可以用称量方法加0.4g。
  加入烟草DNA纯化溶液B1后需要颠倒数次充分混匀。
  
• 65℃水浴5～10分钟。如果室温放置，DNA产量将降低10～20%。
  
• 加入0.2mL自备氯仿，振荡器上充分振荡混均30秒，此时溶液将呈乳白色。
  • 一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
• 12000～15000g室温离心2分钟。上清透明，中间层为白膜（蛋白层）。
  
• 小心将上清液平均转移到两个新的离心管中，避免触及中间的白膜。
  
• 每个管中加入1.5倍体积的烟草DNA纯化溶液C1，充分颠倒混匀。
  
• 分两次上柱，即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 12000～15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
  
• 室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
  
• 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50～100μL DNA洗脱液，室温放置离心吸附柱1～2分钟。
  
• 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。